Resumen Introducción : La histoplasmosis es una micosis sis témica de distribución universal, altamente endémica en las Américas. Es causada por un hongo dimórfico: Histoplasma capsulatum var. capsulatum. Afecta tanto a inmunocompetentes como a inmunocomprometidos, se observan formas progresivas y diseminadas. Un factor de riesgo muy importante es la infección por HIV/sida, con una tasa de mortalidad del 20-40% en América Latina. El diagnóstico de esta micosis se realiza por métodos convencionales y moleculares o por detección de antígenos y anticuerpos. Métodos : En este estudio retrospectivo, longitudinal y analítico, realizado en un periodo de 2 años, se evaluó la sensibilidad (S) y especificidad (E) de un kit comercial para la detección de antígeno de Histoplasma por técnica de EIA (HC-Ag) en 50 pacientes con histoplasmosis aso ciada a sida. Además, se comparó su rendimiento con el de otras técnicas diagnósticas utilizadas habitualmente en nuestro laboratorio. Resultados : HC-Ag tuvo una S del 94%, E del 96%, coeficiente de verosimilitud positiva (CVP) de 20.68 y coeficiente de verosimilitud negativa (CVN) de 0.06. El tiempo de demora de los resultados fue de 4 días, simi lar al de la detección de anticuerpos y n-PCR y mucho menor que el de los hemocultivos. La combinación de métodos mejoró la S a 100%; con valores similares en E. Conclusión : El método HC-Ag demostró su utilidad en el diagnóstico de histoplasmosis diseminada progresiva y la combinación de métodos es una buena opción para aumentar la sensibilidad y disminuir el tiempo para llegar al diagnóstico de certeza. Esto permite mejorar la estrategia en el manejo de la enfermedad y reducir su tasa de letalidad.

Abstract Introduction : Histoplasmosis is a systemic mycosis of universal distribution, highly endemic in the Americas. It is caused by a dimorphic fungus Histoplasma capsulatum var. capsulatum. It affects both immunocompetent and immunocompromised individuals where progressive and disseminated forms are observed. A very important risk factor is HIV infection/AIDS, with a mortality rate of 20-40% in Latin America. The diagnosis of this mycosis is made by conventional and molecular methods or by antigen and antibody detection. Methods : In this retrospective, longitudinal and ana lytical study, carried out over a period of 2 years, the sensitivity (S) and specificity (E) of a commercial kit for the detection of Histoplasma antigen by EIA technique (HC-Ag) was evaluated in 50 patients with AIDS-associated histoplasmosis. In addition, its performance was compared with that of other diagnostic techniques routinely used in our laboratory. Results : HC-Ag had a S of 94%, E 96%, positive likeli hood coefficient (CVP): 20.68 and negative likelihood coefficient (CVN): 0.06. The delay time of the results was 4 days, similar to that of antibody detection and n-PCR and much less than that of blood cultures. The combination of methods improved S to 100%; with simi lar values in E. Conclusion : The HC-Ag method demonstrated its usefulness in the diagnosis of progressive disseminated histoplasmosis and the combination of methods is a good option to increase sensitivity and decrease the time to reach the diagnosis of certainty. This allows improv ing the strategy in the management of the disease and decreasing its case-fatality rate.

Resumen La aspergilosis invasiva (AI) es una enfermedad grave y con alta mortalidad. Existen factores de riesgo y se describen brotes intrahospitalarios relacionados con construcciones. También se des cribe una entidad relacionada con la infección por COVID-19, conocida como aspergilosis pulmonar asociada a COVID-19 (APAC). Es de vital importancia implementar un tratamiento adecuado y precoz, especialmente en pacientes inmunocomprometidos y críticamente enfermos. El diagnóstico se basa en reconocer los factores predisponentes, la clínica, la obtención de imágenes, exámenes directos, cultivos, histopatología y biomarca dores como el galactomanano. La droga de elección es el voriconazol, pero se deben conocer las alternativas terapéuticas dada la creciente presencia de aislamientos resistentes.

Abstract Invasive aspergillosis (IA) is a serious disease with high mortality. There are several risk factors and in-hospital outbreaks related with construction have been described. An entity related to COVID-19 infection, known as COVID-19 associated pulmonary aspergillosis (CAPA), has recently appeared. Early and appropriate treatment is of paramount importance, especially in immunocompromised and critically ill patients. Diagnosis is based on recognition of predisposing factors, clinical signs, imaging, direct examination, culture, histopathology, and biomarkers such as galactomannan. The drug of choice is voriconazole, but alternative therapies must be taken into account given the increasing presence of resistant isolates.

Background: Histoplasmosis is a mycosis with a high prevalence in HIV/AIDS patients. Clinical presentation includes a wide spectrum of manifestations and diagnosis usually takes up to several weeks in patients who do not present cutaneous lesions. Aim: To determine the clinical and microbiological characteristics as well as some biochemical parameters in patients with AIDS-associated histoplasmosis without tegumentary lesions, in order to develop a guideline which enables an early empiric treatment in cases of difficult diagnosis. Methods: Medical records of 86 patients with histoplasmosis were reviewed; 31 patients with diagnosis of AIDS-associated histoplasmosis without cutaneous lesions were analyzed. Results: Fever was the most frequent symptom (96.7%), lung involvement was observed in 22 patients (70.9%), the most commonly radiological pattern was miliary pattern [(12/22), 54.5%]. Nineteen patients presented with splenomegaly. Blood culture sensitivity was 93.3% (28/30) and serology was positive only in 23.5% of the cases. Eight patients died (25.8%). Patients in which CD4+ T cell lymphocytes count was < 50 cells/μl, albumin levels < 2.5 g/dl and who presented with pancytopenia had an unfavorable outcome. Conclusions: In HIV seropositive patients with fever associated to splenomegaly and bilateral miliar pattern in chest radiography, the empiric treatment with amphotericin B must be considered if signs and symptoms of unfavorable outcome are present and due to the time that it takes to arrive at an accurate diagnosis. In order to confirm the diagnosis, all microbiological samples should be collected prior to initiating therapy.

Resumen Antecedentes: La histoplasmosis es una micosis de gran relevancia en pacientes con SIDA. El cuadro clínico puede ser muy variado y, en enfermos que no desarrollan lesiones cutáneas, el diagnóstico suele demorar varias semanas. Objetivo: Establecer pautas que permitan emplear un tratamiento empírico y precoz en pacientes con histoplasmosis asociada al SIDA sin manifestaciones tegumentarias y determinar las características clínicas, microbiológicas y algunos parámetros bioquímicos en los casos de difícil diagnóstico. Métodos: Se analizaron las historias clínicas de 86 pacientes con histoplasmosis. Fueron seleccionados 31 enfermos con histoplasmosis asociada con SIDA sin lesiones cutáneas. Resultados: La fiebre fue el síntoma más frecuente (96,7%), el compromiso pulmonar se comprobó en 22 enfermos (70,9%). El patrón radiológico más frecuentemente hallado en las radiografías de tórax fue el miliar o micronodulillar bilateral [(12/22), 54,5%]. Diecinueve enfermos presentaron esplenomegalia. Los hemocultivos demostraron una sensibilidad de 93,3% (28/30) y la serología fue positiva en 23,5% de los casos. Fallecieron ocho pacientes (25,8%). Los pacientes con recuentos de linfocitos T CD4+ menores a 50 céls/μl, albúmina menor a 2,5 g/dl y pancitopenia evidenciaron un pronóstico desfavorable. Conclusiones: En los pacientes con infección por VIH, fiebre asociada a esplenomegalia y lesiones micronodulillares bilaterales en la radiografía de tórax debe considerarse el tratamiento empírico con anfotericina B cuando existan signos o síntomas de mal pronóstico, debido al tiempo de demora hasta el diagnóstico definitivo. Previo a iniciar el tratamiento deben tomarse todas las muestras para los estudios microbiológicos que permitan confirmar luego la presunción diagnóstica.

A retrospective study was carried out on 171 cases of disseminated histoplasmosis diagnosed in HIV/AIDS patients during the period 2009-2014. Although HIV diagnosis rates remained stable over the study period, a sensible increase in the number of histoplasmosis cases was observed in the last three years. Disseminated histoplasmosis was prevalent in males with an average age of 37.8 years. At diagnosis, only 54/171 (31.6%) were receiving HAART, and CD4+ T-lymphocyte counts ranged from 4 to 264 cells/μl. Cutaneous lesions, including ulcerated papules or molluscoid plaques, were present in 110/171 (64.3%), with Histoplasma capsulatum being observed in all skin scraping specimens upon Giemsa staining. Respiratory manifestations were second in frequency with bronchoalveolar lavage showing a high diagnostic performance. Radiological findings included milliary patterns, interstitial infiltrates, and focalized condensations. Out of 141 blood cultures performed, H. capsulatum was isolated in 82 (58.2%). No significant difference in diagnostic performance was found between blood cultures and skin scraping (p = 0.6164). Other opportunistic infections were observed in 70/171 (40.9%) prior to or concomitantly with histoplasmosis. Association with Mycobacterium tuberculosis was recorded in 16/171 (9.4%) and one had a multi-drug resistant isolate. The severity of histoplasmosis determined the monotherapy with amphotericin B deoxycholate in 115 (67.3%), itraconazole in 42 (24.5%), and combined therapies in 14 (8.2%). Mortality was 19.9% (34/171). Finally, we emphasize that the higher prevalence in the last three years of the study should prompt the medical community to consider the diagnosis of histoplasmosis to reduce mortality of AIDS patients.

Durante 2009-2014, en nuestro hospital fueron diagnosticados 171 casos de histoplasmosis en pacientes con HIV/sida: 64 en 2009-2011, y 107 en 2012-2014. El mayor número de casos durante el segundo trienio no tuvo relación con la infección por HIV, cuya tasa de diagnóstico permaneció estable. La relación hombre/mujer fue 3.7:1 y la edad media 37.4 años. Al diagnóstico, solo 54/171 (31.6%) recibían TARGA y el recuento de linfocitos T CD4+ varió entre 4 y 264 células/μl. El 64.3% (n = 110) presentó lesiones cutáneas (pápulas ulceradas o "moluscoides") positivas para Histoplasma capsulatum al examen microscópico con tinción Giemsa. Siguieron en frecuencia las manifestaciones respiratorias y el lavado broncoalveolar fue positivo en 41/171 (24.0%) pacientes. Las imágenes radiológicas más frecuentes en orden decreciente fueron patrón miliar, infiltrados intersticiales y condensaciones focales. Se aisló H. capsulatum en 82 (58.2%) de los 141 hemocultivos realizados. No hubo diferencia significativa entre el rendimiento diagnóstico del hemocultivo y el de las escarificaciones cutáneas (p = 0.6164). Otras infecciones oportunistas previas o concomitantes con la histoplasmosis se observaron en 70/171 (40.9%). Se registró asociación con tuberculosis en 16/171 (9.4%) y un aislamiento de Mycobacterium tuberculosis resultó multirresistente. La gravedad del caso determinó el tratamiento con anfotericina B desoxicolato en 115 (67.3%), con itraconazol en 43 (25.1%), y con terapias combinadas en 14 (8.2%). La letalidad fue 19.9% (34/171). La mayor prevalencia en el segundo trienio debe alertar a la comunidad médica a considerar el diagnóstico de la histoplasmosis en pacientes con HIV/sida para disminuir la mortalidad.

Within the genus Candida, Candida albicans is the most commonly isolated species from clinical samples. Due to the emergence of other species which can show a higher index of antifungal resistance, a fast identification of these species is necessary. The aim of this work was to evaluate the performance of the RapID Yeast Plus system from two different subculture media formulations: Sabouraud dextrose agar adjusted by Emmons (the medium is indicated in the equipment insert) and Sabouraud glucose agar, which is the most frequently used in Buenos Aires City laboratories. One hundred and sixty-six clinical sample strains coming from different hospitals belonging to the Mycology Network of Buenos Aires City were studied. From the obtained results, we conclude that the conditions and culture medium indicated by the manufacturer should be followed.

Dentro del género Candida, la especie más frecuentemente aislada de materiales clínicos es Candida albicans. Debido a la emergencia de otras especies que pueden presentar mayor índice de resistencia a los antifúngicos, se hace necesaria la identificación rápida de aquellas. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el rendimiento del sistema RapID™ Yeast Plus a partir de subcultivos en 2 formulaciones diferentes, agar Sabouraud dextrosa modificado por Emmons (medio indicado en el inserto del equipo) y agar Sabouraud glucosado, que es el utilizado habitualmente en los laboratorios de la Ciudad Autónoma de Buenos Aires. Se estudiaron 166 cepas de muestras clínicas provenientes de los distintos hospitales que integran la Red de Micología de la Ciudad de Buenos Aires. De los resultados obtenidos se concluye que se deben mantener las condiciones y el medio de cultivo indicado por el fabricante.

Se desarrolló una microemulsión (ME) para la aplicación tópica de anfotericina B (AmB). Las ME son sistemas versátiles que facilitan la solubilización de principios activos y, además, presentan muchas ventajas para aplicar fármacos en forma tópica. La AmB posee muy baja solubilidad en agua, por lo cual se realizó una evaluación de su solubilidad en distintos aceites y surfactantes. Se confeccionaron diagramas ternarios de fase y se seleccionó una ME-gel que puede ser aplicada tópicamente sin el agregado de agentes espesantes. Se solubilizó hasta 1 mg/g de AmB y el fármaco permaneció estable durante al menos 90 días a 4 °C y a temperatura ambiente, por lo cual esta formulación sería apropiada como un medicamento magistral. El estudio in vitro de permeación en piel mostró que la dosis aplicada penetró completamente (flujo estimado de difusión 10,16 +/- 0,01 µg/cm²/h) y permaneció retenida en la misma durante el tiempo de estudio sin detectarse AmB en el compartimento receptor. La actividad antifúngica y antileishmania in vitro fue adecuada. La AmB es una droga de segunda línea en el tratamiento de la leishmaniasis cutánea; sin embargo, no se dispone de preparados para uso tópico. Esta formulación sería útil para el tratamiento local de las infecciones de piel, evitando efectos adversos sistémicos.

The aim of the present work was to develop a ME for topical delivery of Amphotericin B (AmB). Microemulsions (MEs) are versatile systems to solubilize drugs due to the presence of both a hydrophobic and a hydrophilic region, as well as a distinctive interface composed of surfactant and cosurfactant. MEs have been reported for many advantages for topical application of drugs. Considering that AmB has very low water solubility a screening of surfactants and oils was performed. A gel-like ME system, that can be applied topically without the need for thickeners agents, was selected. AmB was incorporated up to 1 mg/g and remained stable for at least 90 days both at 4 °C and room temperature, so this formulation would be appropriate as a compounding medication. An in vitro skin penetration test was performed, the applied dose penetrated (10.16 +/- 0.01 µg/cm²/h as estimated flux) and remained completely within the skin during the assay; AmB was not detected in the receptor compartment. In vitro antifungal and antileishmanial activity was tested and drug showed proper activity. AmB is a second line drug for the treatment of cutaneous leishmaniasis, but topical dosage forms are still lacking. This system is potentially useful for the treatment of skin infections avoiding drug toxic systemic effects.

The aim of this investigation was to evaluate the results of antifungal susceptibility for various Candida species using the Vitek 2 semi-automated system (AST-YSO1 cards, bioMérieux), and to compare them with those obtained by the CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) broth microdilution reference method (Document M27-A3,2008). The essential agreement (EA) was > 90%, except for Candida glabrata against voriconazole (VCZ); and for Candida krusei against fluconazole (FCZ). The overall categorical agreement (CA) was > 90% when FCZ was evaluated and 89.5% at 24 h and 80.7% at 48 h for VCZ. The average time for obtaining results was 15.5 h. Minor errors were 7.8% at 24 h and 6.1% at 48 h for FCZ, and 10.5% at 24 h and 19.3% at 48 h for VCZ. There was only one very major error for FCZ against Candida parapsilosis and no major errors were observed. For amphotericin B, only three isolates showed MICs = 2 ?g/ml. The Vitek 2 system detected the MIC value for various Candida species and showed excellent agreement with the reference method proposed by the CLSI.

El objetivo de este trabajo fue evaluar los resultados de sensibilidad a los antifúngicos de diversas especies de Candida utilizando el sistema semiautomatizado Vitek 2 (tarjetas AST-YSO1; bioMérieux), y compararlos con los obtenidos por el método de referencia del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), la microdilución en caldo (Documento M27-A3, 2008). La concordancia esencial fue > 90 %, excepto en el caso de Candida glabrata frente al voriconazol (VCZ) y de Candida krusei frente al fluconazol (FCZ). La concordancia global por categoría (variación no mayor que 2 diluciones, sin discriminar por especie) fue > 90 % cuando se evaluó el FCZ, y 89,5 % a las 24 h y 80,7 % a las 48 h con el VCZ. El tiempo promedio para obtener los resultados fue de 15,5 h. Los errores menores (sensible o resistente por un método y dosis dependiente por el otro) para FCZ fueron de 7,8 % a las 24 h y 6,1 % a las 48 h; para VCZ, 10,5 % a las 24 h y 19,3 % a las 48 h. Solo se detectó 1 error muy mayor (resistente por el método de referencia y sensible por Vitek 2) con Candida parapsilosis frente a FCZ a las 48 h. No se observaron errores mayores (sensibles por el método de referencia y resistentes por Vitek 2). Con respecto a la anfotericina B, solo 3 cepas presentaron una CIM = 2 ?g/ml. El sistema Vitek 2 detectó correctamente el valor de CIM para diversas especies de Candida y presentó una excelente concordancia con el método de referencia propuesto por el CLSI.

The aim of this investigation was to evaluate the performance of Vitek 2 YST cards (bioMérieux, Inc., Hazelwood, MO, USA) for the identification of yeasts of the genus Candida. A total of 168 isolates were analyzed and the results were compared to those of the API 20C AUX (24%) o API ID 32C (76%) kits (bioMérieux, Marcy L'Etoile, France). Each isolate was grown in chromogenic agar and in corn meal agar (Oxoid, UK) to observe its micromorphology. C. albicans and C. dublininesis were identified by additional biochemical and molecular tests. The agreement observed was 98.3%. Only three isolates were incorrectly identified by Vitek 2: one strain of C .tropicalis and one strain of C. krusei were identified as C. parapsilosis by YST while one strain of C. krusei was identified with low discrimination. The average time for obtaining results was 18.25 h. Vitek 2 is a simple, safe and useful system for the identification of significant Candida species.

El objetivo del trabajo fue evaluar el desempeño de las tarjetas YST del sistema Vitek 2 para la identificación de levaduras del género Candida. Se analizaron 168 aislamientos; los resultados fueron comparados con los obtenidos por los equipos API 20C AUX (24 %) o API ID 32C (76 %). Cada cepa se subcultivó en agar cromogénico para levaduras y se observó la micromorfología. C. albicans y C. dubliniensis fueron identificadas a través de pruebas bioquímicas y moleculares adicionales. La concordancia observada fue del 98,3 %. Solo tres cepas no fueron identificadas correctamente por el sistema Vitek 2: una cepa de C. tropicalis y una de C. krusei fueron identificadas erróneamente como C. parapsilosis y otra cepa de C. krusei fue identificada de manera incompleta por el software del equipo. El tiempo promedio de identificación con las tarjetas YST fue de 18,25 h. El sistema Vitek 2 surge como un método confiable, simple y efectivo para la identificación de las principales especies del género Candida.

The frst case observed in Argentina of AIDS-related human penicillosis is herein presented. The patient was a six- teen year-old young man coming from a rural area of southern China. He was admitted at the F. J. Muñiz Hospital of Buenos Aires city with severe pneumonia and adult respiratory distress. Penicillium marneffei was isolated from bronchoalveolar lavage fuid and was microscopically observed in a skin cytodiagnosis. P. marneffei identifcation was confrmed by rRNA amplifcation and its phenotypic characteristics. The patient suffered an advanced HIV infection and also presented several AIDS-related diseases due to CMV, nosocomial bacterial infections and Pneumocystis jirovecii which led to a fatal outcome.

Se presenta el primer caso humano de peniciliosis por Penicillium marneffei observado en la República Argentina. El paciente era un joven de 16 años, HIV-positivo, procedente de un área rural del sur de China. El paciente fue internado en el Hospital "F. J. Muñiz" por padecer una neumonía grave con insufciencia respiratoria aguda. El agente causal fue aislado de un lavado broncoalveolar y se lo observó en un citodiagnóstico de piel. La identifcación de P. marneffei fue confrmada por las características fenotípicas del aislamiento y la amplifcación del ADNr. El enfermo padecía una infección muy avanzada por HIV que condujo a la aparición simultánea de infecciones por citomegalovirus, Pneumocystis jirovecii y procesos bacterianos nosocomiales. Este complejo cuadro derivó en una evolución fatal.

A case of cutaneous hialohyphomycosis, due to Fusarium oxysporum, in a 40 years old man is presented. The patient came from Paraguay where he worked in a tropical rural area. His disease had begun 2 months before his admission as a skin ulcer located in the left leg. Clinical characteristics, diagnosis methods, differential diagnosis with other ulcers of the legs in tropical areas as well as therapeutic measures are discussed in this presentation.

Se presenta el caso de un paciente oriundo y procedente del Paraguay, de 40 años de edad, portador de una ulceración crónica en cara externa del pie izquierdo, de 2 meses de evolución, debida a una hialohifomicosis por Fusarium oxysporum. Se destacan las características clínicas, métodos de diagnóstico y terapeútica de esta micosis, además de las diferentes etiologías a considerar en el diagnóstico diferencial de una úlcera en personas procedentes del área tropical o subtropical.